David S. Goyer aveva inizialmente pensato di usare il personaggio Morbius come antagonista, ma la Marvel volle riservarlo per un proprio franchise, così il villain divenne Jared Nomak.

Guillermo del Toro fu ingaggiato per dirigere Blade II dal presidente della produzione della New Line Cinema Michael De Luca, dopo che Stephen Norrington rifiutò di tornare alla regia del sequel.

Del Toro era stufo del concetto romantico dei vampiri come eroi vittoriani tormentati e voleva riportare i vampiri a essere davvero spaventosi.

Prima di iniziare le riprese, del Toro rivide integralmente tutti i giornalieri del primo film Blade, circa quattro scatole di nastri, per comprendere a fondo lo stile narrativo di Norrington.

La popstar Michael Jackson, amico di lunga data di Wesley Snipes, avrebbe dovuto avere un piccolo ruolo come vampiro nel film, ma impegni presi in precedenza dal cantante portarono la produzione a tagliare la scena.

Il personaggio di Verlaine, secondo la sceneggiatura originale, era la sorella gemella di Racquel, personaggio comparso nel primo film Blade.

Le riprese si sono svolte in Repubblica Ceca, presso i Prague Studios e i Barrandov Studios, oltre che a Londra, dal 12 marzo al 2 luglio 2001.

Gli effetti visivi digitali, inclusi i doppi digitali di alcuni personaggi, furono realizzati dalla Tippett Studio, mentre Steve Johnson e la sua compagnia XFX crearono il trucco protesico e gli effetti animatronici.

La maglietta indossata dal personaggio di Scud cita il fumetto di Hellboy, l'eroe preferito di Guillermo del Toro; l'attore Ron Perlman, che interpreta Reinhardt, vestirà poi i panni di Hellboy nei film dedicati al personaggio.

La frase pronunciata nel film 'Un uomo senza paura!' è un omaggio a Daredevil, un altro eroe Marvel Comics.

Quando Scud esclama 'il cavaliere nero è tornato!' riferendosi a Blade, è un omaggio a Batman della DC Comics.

La scena in cui Blade taglia in due Reinhardt è un omaggio al manga Vampire Hunter D, dove accade la stessa cosa.

La vetrata della chiesa dove combattono Blade e Nomak riproduce l'Occhio di Agamotto, il medaglione del Dottor Strange, altro personaggio Marvel Comics.

In una scena in cui alcuni membri dell'Emobranco guardano la televisione appare l'eroe Deadpool in forma di cartone animato, e poco dopo, nel rifugio di Whistler, compaiono in tv le Superchicche.

Il combattimento tra Blade e Reinhardt, in cui Blade lo colpisce al viso con una mano mentre agita una lama con l'altra, è un omaggio al film western italiano ...continuavano a chiamarlo Trinità.

Nella scena iniziale in discoteca, mentre Blade cammina lungo una parete, appare la scritta 'SKRULL', riferimento alla razza aliena Marvel Comics.